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植物總酚(Total Phenols,TP)試劑盒說明書

發(fā)布時間:2023/11/9      點擊次數(shù):956

植物總酚(Total Phenols,TP)試劑盒說明書

                                                      微量法100T/48S

 

 

   正式測定之前選擇2-3個預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測定。

測定意義:

植物酚類物質(zhì)具有清除自由基,抗氧化抗衰老的作用,具有較高的營養(yǎng)價值和醫(yī)療保健作用而廣泛應(yīng)用于化妝品、食品、醫(yī)藥等領(lǐng)域。

 

測定原理:

在堿性條件下,酚類物質(zhì)將鎢鉬酸還原,產(chǎn)生藍色化合物,在760nm處有特征吸收峰,測760nm處的吸光值,即可得樣品總酚含量。

自備實驗用品及儀器:

天平、烘箱、粉碎儀、篩子、超聲破碎儀、60%乙醇、離心機、可見分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96孔板、蒸餾水。

 

試劑組成和配制:

提取液:60%乙醇,自備。

試劑一:液體3mL×1瓶,4保存。

試劑二:液體5mL×1瓶,4保存。

總酚提取:

直接檢測

 

測定操作表:

1、   分光光度計/酶標儀預(yù)熱30min,調(diào)節(jié)波長至760nm,蒸餾水調(diào)零。

2、   操作表


對照管

測定管

樣本待測液(µL

10

10

試劑一(µL


50

混勻,25℃靜置2min

試劑二(µL

50

50

H2OµL

140

90

混勻,25℃靜置10 min,于微量石英比色皿/96孔板中,測定760nm吸光值,ΔA=A測定-A對照。

 

總酚含量計算公式:

標準曲線:y = 2.808x+0.0012,R2 = 0.9994

總酚含量(mg/g 干重)=ΔA-0.0012 ÷2.808

                     = 0.356×ΔA–0.0012

 

注意事項:

 

1. 吸光值大于2,樣品適當稀釋再測定,注意計算公式里乘以稀釋倍數(shù)。

2. 試劑一對皮膚有一定的刺激性,請操作時做好防護措施。

3. Z低檢出限為2.4 μg/g。


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