熒光PCR檢測(cè)試劑盒的實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)，是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR過程，然后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。它在熒光免疫分析中常用于標(biāo)記抗原或抗體，也可用于檢測(cè)微環(huán)境的微觀特征，如表面活性劑膠束、雙分子膜、蛋白質(zhì)活性位點(diǎn)等。一般要求探針具有大摩爾吸收系數(shù)和高熒光量子產(chǎn)率；熒光發(fā)射波長為長波，具有較大的斯托克斯位移；用于免疫測(cè)定時(shí)，與抗原或抗體的結(jié)合不得影響其活性。
熒光PCR檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品特性介紹：
重復(fù)性好：擴(kuò)增曲線重合度高，受干擾影響少。
靈敏度高：能對(duì)低拷貝或多樣性模板進(jìn)行定量。
特異性強(qiáng)：采用熱啟動(dòng)酶的激活機(jī)制，抑制非特異性擴(kuò)增。
擴(kuò)增效率高：擴(kuò)增曲線Ct值低，起峰快，效率高。
熒光PCR檢測(cè)試劑盒檢測(cè)方法的局限性有什么？
1.樣品檢測(cè)結(jié)果與樣品采集、加工、運(yùn)輸和保存的質(zhì)量有關(guān)；
2.如果在樣品提取過程中沒有很好地控制交叉污染，可能會(huì)出現(xiàn)假陽性結(jié)果；
3.陽性對(duì)照和擴(kuò)增產(chǎn)物的泄漏將導(dǎo)致假陽性結(jié)果；
4.病原體在流行過程中的基因突變和重組會(huì)導(dǎo)致假陰性結(jié)果；
5.不同的提取方法提取效率不同，會(huì)導(dǎo)致假陰性結(jié)果；
6.試劑運(yùn)輸、儲(chǔ)存不當(dāng)或試劑制備不準(zhǔn)確導(dǎo)致試劑檢測(cè)效率下降、假陰性或定量檢測(cè)結(jié)果不準(zhǔn)確；
7.測(cè)試結(jié)果僅供參考。如果需要診斷，請(qǐng)結(jié)合臨床癥狀和其他檢測(cè)方法。
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