熒光PCR檢測試劑盒采用的是實時熒光定量PCR技術(shù),這種技術(shù)是指在PCR反應體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,最后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。
熒光PCR檢測試劑盒產(chǎn)品性能:
1.操作簡單:只需一次加樣,可完成cDNA合成和定量PCR實驗,同時還可避免樣本交叉污染。
2.靈敏度高:緩沖體系中添加了提高擴增能力的促進因子,可檢測低至10pg的總RNA。
3.特異性強:預混液中添加了有效抑制非特異性擴增的組分,可抑制引物二聚體的產(chǎn)生,定量更為精確。
4.優(yōu)秀的擴增性能:良好的線性關(guān)系,擴增效率可高達99%,且重復性高。
5.適用于所有機型:試劑盒中有獨立包裝的的ROXI和ROXII、可用于校正孔與孔之間產(chǎn)生的熒光信號誤差。
PCR快速檢測試劑盒具體操作步驟如下:
1.從試劑盒中分別取出熒光反應液、陰性對照、陽性對照。
2.在室溫下*溶解后,充分震蕩混勻,瞬時離心。
3.取出PCR八連管,放在PCR板上。
4.在PCR八連管內(nèi)分裝20μl熒光反應液,分別向6個PCR管中加入5μL提取好的樣品核酸,其余兩個管內(nèi)分別加入5μl陰性對照和5μl陽性對照。完成后蓋上管蓋,并在右上角做好標記。
5.將標記好的PCR八連管放入儀器震蕩混勻后瞬時離心,取出后拿起觀察有無氣泡。
6.打開熒光定量PCR儀器,將PCR八連管放入卡槽中,蓋上儀器。
7.點擊實驗程序,選擇新建實驗,點擊運行程序,并按照PCR八連管標記順序依次選擇孔位信息:待測樣本、陽性對照、陰性對照。
8.點擊開始按鈕,運行實驗。
9.實驗完成后,在屏幕查看實驗結(jié)果,點擊詳細數(shù)據(jù)可查看實驗數(shù)據(jù),進行數(shù)據(jù)回顧。