植物全鈣含量試劑盒說明書
測定意義:
鈣是植物結(jié)構(gòu)組成元素,主要構(gòu)成果膠酸鈣、鈣調(diào)素蛋白、肌醇六磷酸鈣鎂等,在液泡中有大量的有機酸鈣,如草酸鈣、檸檬酸鈣、蘋果酸鈣等。鈣能穩(wěn)定細胞膜、細胞壁,還參與第二信使傳遞,調(diào)節(jié)滲透作用,具有酶促作用等。
測定原理:
濃硫酸高溫消解植物樣品,采用火焰光度計測定樣品中的鈣含量。
自備實驗用品及儀器:
消解儀、消化管、天平、烘箱、100目篩、移液管、濃硫酸、火焰光度計。
試劑組成和配制:
標準品:液體20mL×1瓶,4℃保存。濃度為1mmol/L母液。
樣本處理:
新鮮植物樣本風(fēng)干或50℃烘干,過100目篩,稱0.5g左右置于消化管中,加1mL蒸餾水潤濕樣品,再加10mL濃硫酸,輕輕搖勻,同時做兩個樣品空白管,置于消解儀上,消解參數(shù)設(shè)置為:100℃,10min;200℃,10min;350℃,20min;400℃,30min。消解結(jié)束后用蒸餾水定容至100mL待測(也可取1ml樣品加9ml蒸餾水稀釋十倍)。
測定操作:
1.標準曲線繪制
標準品(mL) | 0 | 0.08 | 0.4 | 2 | 10 |
蒸餾水(mL) | 10 | 9.92 | 9.6 | 8 | 0 |
標準品濃度(μmol/L) | 0 | 8 | 40 | 200 | 1000 |
2.樣品測定
取樣品用火焰光度計測定,若濃度為1000μmol/L以上則進行適當稀釋。
計算公式:
全鈣含量(g/kg 干重)= C×V總×稀釋倍數(shù)÷W×10-3×40
C:樣品濃度;μmol/L;V總:加入提取液體積,100mL= 0.1L,W:樣本質(zhì)量,g
注意事項:
1. 未經(jīng)特殊處理的樣品消解為白色或無色即消解wan全,否則延長消解時間繼續(xù)消解至消解液發(fā)白。
2. 每次開機需做標準曲線。
配方:
標準品:配方
標準品:1mmol/L CaCl2溶液 取100mL試劑瓶,稱11.1mg氯化鈣溶于100mL蒸餾水
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