志賀菌屬是主要的腸道致病菌之一,是引起人類(lèi)細(xì)菌性痢疾的病原體。以下從生物學(xué)性狀、臨床意義、微生物學(xué)檢驗(yàn)等方面為你詳細(xì)介紹志賀菌屬相關(guān)技術(shù)內(nèi)容。
生物學(xué)性狀
形態(tài)與染色
志賀菌屬為G - 短桿菌,無(wú)鞭毛,無(wú)莢膜,有菌毛,不形成芽胞。
培養(yǎng)特性
兼性厭氧,營(yíng)養(yǎng)要求不高。因不發(fā)酵乳糖,在腸道選擇性培養(yǎng)基上形成無(wú)色菌落(宋內(nèi)志賀菌遲緩發(fā)酵),例如福氏志賀菌在SS平板上及中國(guó)藍(lán)平板上呈現(xiàn)無(wú)色菌落。
生化反應(yīng)
氧化酶陰性,不分解乳糖(宋內(nèi)遲緩分解),分解葡萄糖產(chǎn)酸不產(chǎn)氣。A群不分解甘露醇、D群β - 半乳糖苷酶 +、鳥(niǎo)氨酸脫羧酶試驗(yàn)陽(yáng)性。O抗原是分類(lèi)的依據(jù),O抗原分為群特異性抗原和型特異性抗原。志賀菌分為4個(gè)血清群,44個(gè)血清型。
抗原結(jié)構(gòu)
只有O、K抗原,無(wú)H抗原。
抵抗力
較弱,對(duì)酸敏感。
志賀菌屬分類(lèi)
A群:痢疾志賀菌(S.dysenteriae),有10個(gè)血清型,是唯-一不發(fā)酵甘露醇的一群志賀菌。
B群:福氏志賀菌(S.flexneri),有13個(gè)血清型(包括變型和亞型),各型間有交叉反應(yīng)。
C群:鮑氏志賀菌(S.boydii),有18個(gè)血清型。
D群:宋氏志賀菌(S.sonnei),抗原單一,只有1個(gè)血清型。是唯-一具有鳥(niǎo)氨酸脫羧酶的一群志賀菌。宋氏志賀菌有I相和I相兩個(gè)交叉變異相。I相形成S型菌落,對(duì)小鼠有致病力,多自急性期感染病人標(biāo)本中分離得到。I相為R型菌落,對(duì)小鼠不致病,常從慢性病人或帶菌者中檢出。I相抗原受控于一個(gè)大質(zhì)粒,若質(zhì)粒丟失,I相抗原不能合成,菌則從有毒的I相轉(zhuǎn)變?yōu)闊o(wú)毒的I相。
臨床意義
致病物質(zhì)
-普通菌毛:能黏附于腸粘膜上皮細(xì)胞,引起炎癥反應(yīng),是定植因子。
-內(nèi)毒素:可引發(fā)腸毒素性、神經(jīng)毒性和細(xì)胞毒性等多種毒性反應(yīng)。
-外毒素(Vero毒素):同樣具有較強(qiáng)的致病作用。
所致疾病
-細(xì)菌性痢疾:包括急性菌痢、慢性菌痢、中毒性菌痢,還存在帶菌者情況。
微生物學(xué)檢驗(yàn)
標(biāo)本采集
最好在治療前采集黏液膿血便,如不能及時(shí)接種,需置于甘油保存液或卡 - 布運(yùn)送培養(yǎng)基運(yùn)送,必要時(shí)采集肛拭子。
標(biāo)本直接檢查
可用膠乳凝集試驗(yàn)和免疫熒光技術(shù)檢測(cè)抗原,也可以直接檢測(cè)核酸。
分離培養(yǎng)
使用SS平板和中國(guó)藍(lán)平板,志賀菌在SS平板和中國(guó)藍(lán)平板上形成無(wú)色菌落(宋內(nèi)志賀菌培養(yǎng)48 - 72小時(shí)為有色菌落,遲緩發(fā)酵乳糖)。也可使用XLD瓊脂平板和MAC瓊脂平板或志賀氏顯色培養(yǎng)基等進(jìn)行分離。
鑒定
-初步鑒定:用KIA和MIU。將在KIA上出現(xiàn)KA--,MIU上出現(xiàn) - +/--,可進(jìn)一步鑒定到屬和種,后續(xù)還需進(jìn)行生化和血清學(xué)試驗(yàn)。例如A群甘露醇 -;D群β - 半乳糖苷酶 +,鳥(niǎo)氨酸 + 。
-最終鑒定:依全面生化反應(yīng)及血清學(xué)試驗(yàn)作出最終鑒定。生化反應(yīng)確定到志賀菌屬后,繼續(xù)做血清學(xué)試驗(yàn)鑒定到群、型。先與志賀菌屬多價(jià)診斷血清(A群1,2型、B群1 - 6型、C群1 - 6型及D群)做玻片凝集試驗(yàn),凝集者進(jìn)一步做群、型鑒定。
鑒別試驗(yàn)
-與大腸埃希菌的鑒別:志賀菌屬與大腸埃希菌之間的DNA相關(guān)性很高,尤其是與EIEC在生化特征上難以鑒別,在血清學(xué)上有交叉反應(yīng)。下述特性有助于鑒定志賀菌種:①無(wú)動(dòng)力,賴氨酸陰性;②發(fā)酵糖產(chǎn)酸不產(chǎn)氣(福氏志賀菌6型、鮑氏志賀菌13和14型、痢疾志賀菌3型除外);③醋酸鈉 -、葡萄糖銨 -、粘質(zhì)酸鹽 - 。
-與類(lèi)志賀鄰單胞菌鑒別:可用動(dòng)力和氧化酶試驗(yàn)加以鑒別,志賀菌屬均為陰性,而類(lèi)志賀鄰單胞菌為陽(yáng)性。
-與傷寒沙門(mén)菌鑒別:傷寒沙門(mén)菌在KIA培養(yǎng)基上的表現(xiàn)與志賀菌相似,鑒別點(diǎn)是傷寒沙門(mén)菌硫化氫和動(dòng)力陽(yáng)性,能與沙門(mén)菌屬因子血清(OA - F、O9、Vi)凝集而不與志賀菌屬因子血清凝集。
-血清學(xué)鑒定:凡生化反應(yīng)符合志賀菌屬者均需作血清學(xué)鑒定,可先用志賀菌屬4種多價(jià)血清作玻片凝集試驗(yàn),凝集者再進(jìn)一步作定型鑒定。我國(guó)現(xiàn)有的定群及定型診斷血清包括痢疾志賀菌1型和2型血清,福氏志賀菌(1 - 6型)血清,鮑特志賀菌(1 - 6型)和宋內(nèi)志賀菌血清。
在國(guó)內(nèi)各地報(bào)告的志賀菌屬感染以(B群)福氏志賀菌為多見(jiàn),約占總數(shù)的70%以上,其次為(D群)宋內(nèi)志賀菌及A群2型。在B群中又以1b、2a及3型居多。
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