原代細(xì)胞培養(yǎng)的主要注意事項(xiàng)
更新時(shí)間:2024-10-22 點(diǎn)擊次數(shù):174
原代小梁網(wǎng)細(xì)胞培養(yǎng)體系是一個(gè)為體外生長(zhǎng)的人、大鼠、小鼠、兔等哺乳動(dòng)物的小梁網(wǎng)細(xì)胞設(shè)計(jì)的理想的完培方案。本體系是一個(gè)基于碳酸氫鹽的緩沖體系,可以在孵育的5%的CO2的氣體環(huán)境下維持一個(gè)圍繞pH7.2的酸堿緩沖體系。本體系是一個(gè)無(wú)菌的液體混合系統(tǒng),其中包含必須和非必須氨基酸、維生素、激素、生長(zhǎng)因子、微量元素和一些其他的有機(jī)和無(wú)機(jī)化合物以及胎牛血清(10%)。本培養(yǎng)體系是基于固定配方配制的液態(tài)培養(yǎng)體系,可以為體外培養(yǎng)的人、大鼠、小鼠、兔等哺乳動(dòng)物的小梁網(wǎng)細(xì)胞提供一個(gè)確定適宜的平衡營(yíng)養(yǎng)環(huán)境,并且可以選擇性的促進(jìn)小梁網(wǎng)細(xì)胞的擴(kuò)增。
注意事項(xiàng):
1、組織塊培養(yǎng)法:
(1)剛接種后,組織塊粘附不牢固,觀察和轉(zhuǎn)移過(guò)程中動(dòng)作要輕,以防引起液體振蕩,使組織塊漂起
(2)培養(yǎng)初期,要注意觀察有無(wú)細(xì)菌、霉菌污染
(3)原代培養(yǎng)要及時(shí)觀察,記錄
(4)過(guò)3-5天,需要換液以除去漂浮組織塊和殘留的血細(xì)胞,保證原代細(xì)胞正常生長(zhǎng)
2、消化培養(yǎng)法:某些特殊類型細(xì)胞如內(nèi)皮細(xì)胞需用特殊的消化手段和步驟進(jìn)行
3、器官培養(yǎng)和組織塊培養(yǎng)類似
4、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法:注意調(diào)整細(xì)胞濃度