ELISA是一種基于免疫反應(yīng)的高靈敏度實驗技術(shù),將抗原和抗體的特異性反應(yīng)與酶在底物上的高效催化結(jié)合起來。
1、操作前應(yīng)充分了解試驗的物理參數(shù),如環(huán)境溫度、反應(yīng)培養(yǎng)溫度和培養(yǎng)時間、洗滌次數(shù)等。應(yīng)首先檢查水培養(yǎng)箱溫度和ELISA試劑盒是否符合要求。
2、要保證加液量。當我們使用它時,我們覺得滴瓶不如采樣器好。滴水瓶不容易控制。禁止添加液體量,導(dǎo)致顯色不一致和判斷故障。
3、正確使用取樣器。取樣器應(yīng)直接接觸樣本或試劑,以避免刮傷涂層板的底部。采樣過程中,避免液體飛濺和血清殘留在反應(yīng)孔壁上。應(yīng)清潔取樣器的吸入頭,以避免污染。采樣順序應(yīng)與說明書一起,否則可能導(dǎo)致效果錯誤和測試重復(fù)性差。
4、顯色液用量不宜過多。添加樣品的工作環(huán)境不應(yīng)在陽光直射下。加入顯色體系后,避免光反應(yīng)。顯色液的用量不宜過多,以免顯色性強。
5、手動清洗板和添加清洗液時,沖擊力不宜過大。清洗時間不得超過說明書中建議的清洗時間。洗滌液不應(yīng)在反應(yīng)室內(nèi)停留太久。不要使乳液在毛孔之間流動,形成毛孔污染,造成假陰性或假陽性。
生長因子ELISA試劑盒使用時容易出現(xiàn)誤差是什么原因:
1、由于不同廠家生產(chǎn)的試劑盒的生產(chǎn)工藝和操作方法略有不同,因此必須嚴格操作所使用的試劑盒,否則容易產(chǎn)生測試結(jié)果的不確定性
2、如果不同批次的人ELISA試劑盒的不同成分(一種溶液或酶工作液)或不同試劑的不同成分交叉使用,可能會出現(xiàn)淺色或高背景、花板等情況。
3、反應(yīng)時間誤差。在制作大量樣品時,第一個孔和下一個孔以及一些特殊樣品可能會產(chǎn)生很大的影響。
4、樣品在臨界值附近波動是正常現(xiàn)象,任何試劑都是不可避免的??梢钥紤]對樣本進行奇數(shù)次復(fù)查。