什么是細胞培養(yǎng)?
細胞培養(yǎng)是指從動物或植物中取出細胞,然后使其在合適的人工環(huán)境中生長。這些細胞可于培養(yǎng)前直接從組織中取出并采用酶或機械方法進行解離,或者也可來自已經建立的細胞系或細胞株。
原代培養(yǎng)
原代培養(yǎng)是指將細胞從組織中分離后,使其在合適的條件下增殖直到占據所有可用基質 (即:達到匯合狀態(tài))的培養(yǎng)階段。在此階段,必須將細胞轉移到新的容器中并更換新鮮培養(yǎng)基,從而對細胞進行傳代培養(yǎng),為其提供更多繼續(xù)生長的空間。
細胞系
首-次傳代培養(yǎng)后,原代培養(yǎng)物即被稱為細胞系或者亞克隆。來自于原代培養(yǎng)的細胞系 壽命有限(即:有限細胞系,見下文),隨著細胞的傳代,生長能力*的細胞會占據優(yōu) 勢,最終導致細胞群體在基因型和表型上達到一定程度的均一性。
細胞株
如果將細胞系的一個亞群通過克隆或者其他方法從培養(yǎng)物中明確地選擇出來,則此細胞 系就成為一個細胞株。與親代細胞系起始時相比,細胞株往往會獲得其他一些遺傳學 改變。
有限細胞系 與連續(xù)細胞系
正常細胞通常只能分裂有限的次數(shù),隨后就會喪失增殖的能力,這是一個由遺傳決定的 事件,被稱為衰老;這種細胞系被稱為有限細胞系。但是,一些細胞系會通過被稱為 轉化的過程變?yōu)橛郎约毎?,這一過程可自然發(fā)生,也可經化學或病毒誘導發(fā)生。有 限細胞系發(fā)生轉化獲得無限分裂能力后,就成為連續(xù)細胞系。
培養(yǎng)條件
各種細胞的培養(yǎng)條件相差很大,但是細胞培養(yǎng)的人工環(huán)境必須包括合適的容器,容器中 含有一定的基質或介質,為細胞提供必需的營養(yǎng)素(氨基酸、碳水化合物、維生素、礦物 質)、生長因子、激素和氣體(。2、CO2),并可調節(jié)其物理化學環(huán)境(pH、滲透壓、溫度)。 大多數(shù)細胞均具有貼壁依賴性,必須貼附在固體或半固體基質上培養(yǎng)(貼壁或者單層培養(yǎng)), 而另一些細胞則可在培養(yǎng)基中漂浮生長(懸浮培養(yǎng))。
凍存
如果傳代時有多余的細胞,可通過適當?shù)谋Wo劑(例如:DMSO或甘油)處理細胞,儲存 在-130°C以下的溫度下(凍存),直到需要使用之時。
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